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J – Biosafety evaluation of equine umbilical cord-derived mesenchymal stromal cells (UC-MSCs) by systematic pathogen screening in peripheral maternal blood and paired UC-MSCs

- Denys, A - Léon, A - Robert, C - Saulnier, N - Josson-Schramme, A - Legrand, L -Wimel, L - Maddens, S – Pronost,

Contexte : L’intérêt croissant pour les cellules stromales mésenchymateuses (CSM) en médecine équine, ainsi que le développement des biobanques de CSM à usage allogénique, suscitent des inquiétudes quant à la biosécurité de ces produits. Les CSM dérivées du cordon ombilical (CO) comportent un risque inhérent de contamination par les conditions environnementales et de transmission verticale d’agents pathogènes par les poulinières. Il n’existe encore aucun rapport dans la littérature scientifique sur la contamination des chevaux par des produits CSM infectés, ni aucun consensus sur le dépistage infectieux systématique des cellules stromales mésenchymateuses dérivées du cordon ombilical (CSM-CO) pour garantir la sécurité microbiologique des produits thérapeutiques.

Objectifs : Développer un protocole standard pour assurer la sécurité microbiologique des CSM-CO et évaluer le risque de transmission verticale d’agents pathogènes intracellulaires communs des poulinières aux CSM-CO jumelées.

Matériel et méthodes : Quatre-vingt-quatre échantillons de CO et de sang maternel périphérique (SMP) appariés ont été prélevés entre 2014 et 2016. La stérilité a été surveillée par des contrôles microbiologiques. La contamination maternelle a été testée par un dépistage systématique par PCR de 14 agents pathogènes et un test de Coggins. En cas de résultat positif à la PCR pour un ou plusieurs agents pathogènes dans les SMP, une analyse PCR pour le ou les agents pathogènes détectés a ensuite été réalisée sur les CSM-CO associées.

Résultats : Dix des 84 échantillons de CU ont été contaminés lors de l’extraction et 6/84 sont restés positifs en primo-culture. La possible transmission verticale a été étudiée sur les 78/84 échantillons appariés de SMP et de CSM-CO restants; 37/78 échantillons de SMP étaient positifs par PCR pour l’herpèsvirus équin (EHV)-1, EHV-2, EHV-5, Theileria equi, Babesia caballi, et/ou Mycoplasma spp. L’hépacivirus a été détecté dans 2/27 cas et le virus associé aux maladies de Theiler dans 0/27 cas (pas effectué sur tous les échantillons en raison de l’ajout tardif). Tous les échantillons appariés d’CO-MSC testés pour le(s) pathogène(s) spécifique(s) détecté(s) dans le SMP étaient négatifs (37/37).

Principales limites : Des données supplémentaires sont nécessaires concernant la sensibilité des CSM à la plupart des agents pathogènes détectés dans les SMP.

Conclusions : Les contrôles microbiologiques en cours de fabrication combinés au dépistage par PCR des BPM fournissent une évaluation complète de l’exposition des CSM au risque infectieux, le risque de transmission verticale semblant intrinsèquement faible.

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